ʻO ka hopena kaulahao Polymerase, i hoʻopau ʻia e like mePCRma ka ʻōlelo Pelekania, he ʻenehana biology molecular i hoʻohana ʻia e hoʻonui i nā ʻāpana DNA kikoʻī.Hiki ke noʻonoʻo ʻia he hoʻopiʻi DNA kūikawā ma waho o ke kino, hiki ke hoʻonui nui i kahi DNA liʻiliʻi loa.I ka wā holoʻokoʻaPCRʻO ke kaʻina hana pane, hoʻokahi papa o nā mea waiwai ke kuleana nui - nā enzymes.
1. Taq DNA
Ma na hoao ana i na la mua oPCR, Ua hoʻohana nā kānaka ʻepekema i ka Escherichia coli DNA polymerase I, akā aia kekahi pilikia me kēia enzyme: pono e hoʻopiha hou i ka enzyme hou i kēlā me kēia manawa e hana ʻia kahi pōʻai, kahi e paʻakikī iki ai ka hana a paʻakikī ke hoʻonui ʻokoʻa.Ua hoʻoholo ʻia kēia pilikia ma hope o ka hoʻokaʻawale ʻana o ka poʻe ʻepekema i ka Taq DNA polymerase mai Thermus aquaticus i ka makahiki 1988. Mai ia manawa, ua lilo ka hoʻonui ʻana i ka DNA.ʻO ka loaʻa ʻana o kēia enzyme e hana pū kekahiPCRʻenehana he ʻenehana kūpono, kūpono a me ke ao holoʻokoʻa.I kēia manawa, ʻo Taq DNA polymerase ka polymerase maʻamau i nā pahu DNA.
2. PfuDNA
E like me ka mea i ʻōlelo ʻia ma luna nei, he ʻōpala nui ʻo Taq DNase, no laila ua hoʻololi nā ʻepekema i ka Taq DNA polymerase i kekahi ʻano i mea e pale aku ai i ka hoʻonui ʻole ʻia ma muli o ka mismatching, e hopena i nā hopena hoʻokolohua kūpono ʻole.Akā ʻo ka hoʻololi ʻana o Taq DNA polymerase hiki ke kāohi i ka hana o ka DNA polymerase ma ke ana wela.Hiki i ka PfuDNA polymerase ke hoʻoponopono i nā hemahema o luna o Taq DNA polymerase, i hiki ke hana maʻamau ka hopena o ka PCR, a hiki ke hoʻomaikaʻi maikaʻi ʻia ka helu kūleʻa o ka hoʻonui ʻana i nā gene.
3. Reverse Transcriptase
Ua ʻike ʻia ka reverse transcriptase i ka makahiki 1970. Hoʻohana kēia enzyme i ka RNA ma ke ʻano he laʻana, dNTP ma ke ʻano he substrate, e hahai ana i ke kumu o ka pairing base, a synthesizes i kahi kaula DNA hoʻokahi e hoʻohui i ka template RNA ma ke kuhikuhi 5′-3′.ʻO ka hoʻohuli ʻana i ka transcriptase e hilinaʻi nui ʻia i ka hana DNA polymerase mai DNA a i ʻole RNA templates a no laila ʻaʻohe 3′-5′ exonuclease hana.Eia nō naʻe, loaʻa iā ia ka hana RNase H, e kaupalena ana i ka lōʻihi o ka synthesis o ka reverse transcriptase i kekahi ʻano.Ma muli o ka haʻahaʻa haʻahaʻa a me ka thermostability o ka wild reverse transcriptase, ua hoʻololi ʻia e nā ʻepekema.
No ka meaPCRʻO nā mea hoʻohana nui: ʻo ka paipu PCR pākahi, 4/8-strip PCR paipu, nā pā PCR.
ʻO LabioʻO nā mea hoʻohana PCRloaʻa kēia mau meapono:
Nā papa PCR: Pākuʻi holo kaʻa wela ākea;ʻO ka ʻokoʻa kiʻekiʻe, ʻike maikaʻi maʻalahi;maikaʻi ka hoʻomaʻamaʻa fluorescence;hoʻoili wela;ʻO DNase, RNase, DNA, PCR inhibitors, a me ka pyrogen-free i hoʻāʻo ʻia.
Nā paipu PCR pākahi: Paʻa-evaporation; maikaʻihoʻoili wela;ʻike maikaʻi maikaʻi loa; DNase hōʻoia, RNase, DNA, PCR inhibitors, a hoʻāʻo ʻole pyrogen-free.
4/8-paʻi paipu PCR: ʻO nā paia ʻeleʻele ʻeleʻele, ka mālamalama kiʻekiʻe;hiki ke hoʻohana i ka ʻoihana lāʻau lapaʻau, ʻoihana meaʻai, a me ka biology mole; kiʻekiʻe kiʻekiʻe, virgin PP material; DNase hōʻoia, RNase, DNA, PCR inhibitors, a hoʻāʻo ʻole pyrogen-free.
Ka manawa hoʻouna: Jun-09-2023